【ONEG-018】素人騙し撮り Vol.18 脱がし屋 美人限定。 三浦まい

板块一：复杂系统的缔造

生物系统的“临界性特色”，在生物进化的过程中，由于基因和基因之间的相互调控以及各样调控元件的介入，使得其保捏在一中不富厚且多变的情景。

不同基因的节点与节点之间的相互作用，造成了一套复杂网罗化的横向因果关系，在相互作用的集群中，节点输入（基因元件或调控元件）的渺小变化可能会引起输出的庞大变化；这些勾通之间存在一定的稳态，在变量环境中，由进化和自组织模子介导出现的变异数（基因突变和外源片断插入）。

本文中的RetroMyelin是在最终物种造成后发生的颓落入侵事件，随后宿主物种内序列拷贝磨蹭各样化；即在稳描摹态下引入的变量，在自组织模子和进化调控的模子基础上调控有颌脊椎动物髓鞘的造成；本议论中草率到了大鼠RNLTR12-int介导了SOX10调控MBP的造成，进而促进了髓鞘的造成。随后在有颌脊椎动物中草率到了RetroMyelin，况且RetroMyelin只可在有颌脊椎动物中检测到，在无颌脊椎动物和无脊椎动物中检测不到。本议论中的模子变量和对应的模子扫尾如下：

输入变量：RetroMyelin（邃古逆转录病毒残余）屡次颓落入侵

输出扫尾：趋同进化，促进了髓鞘的造成

模子扫尾：促进更复杂的大脑结构造成和更各样的物种形态出现

板块二

议论布景

2.1 转座子

见地：一段DNA序列，粗略在基因组中通过剪切或转录-逆转录后，在内切酶的作用下，环化后插入另一位点，并对自后的基因起到调控作用。

特征：不错自我复制，不错在染色体上移动；被觉得是导致生物基因渐变或突变并最终促使生物进化的根柢原因（因此是物种进化的焦虑踪迹）。转座子的存在证明基因组并不是一个静态的集合，而是一个约束改造自己组成的动态有机体。一部分II型转座子由于“突变蕴蓄”失去了转座能力，在进化过程中被“驯化”，参与到基因抒发的调控中；转座子在物种基因组中的散布不是飞速的，当然选定会筛选关于宿主活命稳妥的插入片断。

麦克林托克：转座子不仅不错移动，还不错把柄特定环境条款或在细胞发育的不同阶段翻开或关闭。

分类：把柄转座子“超过” 容貌的不同，分为I型和II型转座子

I型转座子：中间体是RNA，转座子会先被转录为RNA，然后该RNA被逆转录，再次成为DNA，被插入到目标位点中。本议论中的RetroMyelin属于I型转座子。

II型转座子：转座动作是“剪切后粘贴”，转座子两头是两轨则向调换序列，交壤的是反向调换序列（回环结构），然后才是中间的插入序列。

2.2 髓鞘造成

髓鞘是包裹神经轴突的外壳，由核心神经系统重的少突胶质细胞产生，在有颌动物中初次出现髓鞘，髓鞘的出现使得神经信号不错快速传递，促进更复杂的大脑结构造成和更各样的物种形态出现。MBP：髓磷脂基本卵白（Myelin Basic Protein，是核心神经系统（CNS）中的髓鞘的主要身分，本议论中说明了MBP通过与转录因子SOX10勾通的RNLTR12-int编码的RNA调控其抒发，这一过程关于髓鞘的造成是必要的。

板块三：议论想路

本议论从大鼠大脑分离少突胶质细胞前体（OPC）和少突胶质细胞（OL），借助芯片检测各异逆转录转座子和各异mRNA，通过WGNCA筛选高度估量的调控模块，并借助相对应的免疫千里淀实验，说明RNLTR12-Int~SOX10~MBP的调控旅途。并在后续的实验中说明了RNLTR12-Int是一类转座子，在有颌脊椎动物中均存在雷同的序列，定名为RetroMyelin；RetroMyelin的功能具有保守性，且只在有颌脊椎动物中存在，对有颌脊椎动物的髓鞘造成和大脑复杂结构的造成至关焦虑。

板块四：扫尾选录

4.1 RNLTR12-int是髓磷脂/MBP的潜在诊疗因子

大鼠p7脑平分离的少突胶质细胞（OPC）和训练胶质细胞OL进行芯片检测逆转录转座子，草率各异逆转录转座子和各异mRNA，与OPC比较，OL中的RNLTR12-int有较高的基因抒发水平；为了敬佩草率到的逆转录转座子RNA和卵白编码mRNA之间的潜在功能关系，进行WGCNA分析。草率扫尾清楚有13个高度共调控基因模块，且RNLTR12-int与髓鞘基因共抒发网罗高度估量。通过调控网罗分析，草率出RNLTR12-int与MBP存在显赫的调控关系。

4.2 RNLTR12-int诊疗发育性髓鞘造成中的Mbp抒发

siRNA介导的RNAi，扼制RNLTR12-int的抒发，荧光定位扫尾清楚si组的MBP抒发会被显赫扼制，并适度了OL髓鞘形态的发展。

shmiR-RNLTR12-int腺病毒注入大鼠大脑皮层，细胞中OL早期分化记号物CC1和CNP抒发未显赫缩小，即胁制RNLTR12-int并未影响Ols的分化，只影响了髓鞘的造成。转染后的大鼠大脑细胞中的Mbp抒发显赫缩小；电镜扫尾清楚，转染后的OL会产生更多的无髓鞘轴突，标明髓鞘造成后果缩小；综上扫尾标明，MBP抒发和体内髓鞘造成对RNLTR12-int的依赖性

4.3 RNLTR12-int调控SOX10与MBP启动子的勾通

大鼠大脑-SOX10抗体进行RIP：扫尾清楚SOX10不错与mRNLTR12-int勾通；电泳迁徙率位移测定 （EMSA） 和名义等离子体共振 （SPR）说明了SOX1与mRNLTR12-int勾通的后劲。需要进一步说明SOX10与Mbp启动子的勾通是否依赖于RNLTR12：si RNLTR12-int转染OPC细胞培养，随后进行SOX10-ChIP-qPCR，扫尾说明SOX10 定位到包括 S2 和 S1 的 Mbp 启动子区域（siRNLTR12-int 转染样品中莫得富集 Mbp 启动子区域）。

OL中的其他基因也需要SOX10的调控，比较了RNLTR12-int扼制导致的下调基因列表与OL中潜在的SOX10靶基因；议论发现存31个基因（通盘靶基因的0.8%）由于si RNLTR12-int而下调，标明RNLTR12-int可能只调控一部分SOX10的调控（或者说唯有0.8%不错主要由RNLTR12-int 调控）。

4.4 RetroMyelin只存在于有颌脊椎动物中

基于隐马尔可夫模子在有颌脊椎动物，无颌脊椎动物和无脊椎动物中寻找RNLTR12-int序列，然后进行督察和家眷分析。扫尾清楚只可通盘有颌脊椎动物中找到雷同RNLTR12-int的序列，定名为RetroMyelin（与髓鞘进化估量的逆转录转座子序列）。

从东谈主大小鼠等物种中获取RetroMyelin序列（通盘草率的RetroMyelin齐属于ERV1家眷），比对抒发序列标签（EST）数据库，发现这些在RNLTR12-int上进行NHMMER搜索后得到的最好比对扫尾。

4.5 宿主基因组整合RetroMyelin序列

物种进化过程中，RetroMyelin的得到容貌一般为两种：

1. 在物种造成之前的共同先人那处得到：序列分化会从先人阶段运行，在物种中的拷贝不会蚁合到系统发育树上。

2. 在物种造成后的屡次逆转录病毒侵入中得到；每个物种的序列拷贝会造成单独的簇（分化只在一个物种内发生）

为了说明RetroMyelin的得到容貌，议论选取了22个物种的RetroMyelin拷贝，重构系统发育树，发现每个物种的拷贝齐单独蚁合在沿路，说明了是最终物种造成后发生的单独的入侵事件；每个物种内的序列拷贝的各样性过甚对Mbp抒发的共同选定可能是通过趋同进化发生的。

议论扫尾清楚进化模子中的进化过程中的选定适度了基本基因组的快速分化，因此文中收受了突变率异质性模子，假定核苷酸替换在位点上的进化后果变化解任伽玛散布，通过似然比测验（2ẟ = 1，528.5;p

RetroMyelin的进化相对速度标明（进化速度异质性分析：把柄意想的伽玛散布的累积散布函数并画图计较进化相对速度的期许值），有很多位点（52%）相对保守或正在磨蹭进化。

4.6 RetroMyelin诊疗其他非哺乳类脊椎动物的髓鞘造成

议论为了考证RetroMyelin诊疗其他非哺乳类脊椎动物的髓鞘造成，阔别对斑马鱼和青蛙进行CRISPR-Cas9，剪辑防碍RetroMyelin

斑马鱼：与对照组比较，斑马鱼的形态发育清楚受到适度，检测到脊髓的Mbp信号松开（EGFP荧光信号）。

青蛙：MBP信号显赫缩小。

综上，RetroMyelin在诊疗鱼类、两栖动物和哺乳动物之间的Mbp转录方面具有保守性。

板块五:扫尾参议

5.1 Mbp是髓鞘造成的焦虑身分

Ols不错造成髓鞘，风雅的髓鞘不错加速神经传导，并保捏较小的轴突直径，其中MBP是髓鞘造成的焦虑身分。CNS 和 PNS 的髓鞘包括很多卵白质，举例髓鞘和淋巴细胞卵白 （MAL）、MAG、CNP、卵白脂质卵白、四跨膜卵白脂质 （PLP）、TSPAN2、外周髓鞘卵白 22、脂肪酸勾通卵白 （PMP22） 和 MPZ（一种 Ig 样细胞粘附卵白）。

上述髓鞘估量卵白的嫡系同源物也存在于无颌脊椎动物和无脊椎动物中，并推行其他功能。MBP只存在于有颌脊椎动物中，Mbp的ORF中的部分转录单位也在基因Golli（OL谱系的基因）中存在， Golli存在于七鳃鳗中，但不是MBP的同源物也不是髓鞘造成元素。因此Mbp 的ORF的重新造成是出现风雅髓鞘进化出现存颌脊椎动物的焦虑因素。

5.2RetroMyelin

RetroMyelin存在于通盘的有颌脊椎动物中，并在单个物种内阐述出高度的序列雷同性，并在系统发育树种造成各个物种的不同簇，标明RetroMyelin的得到是物种造成之后的颓落入侵。尽管髓鞘造成需要脊椎动物从共同先人袭取很多要道基因，但RetroMyelin在物种造成后的颓落获取才是促进髓鞘造成的最核心元素。

RetroMyelin表面上发祥于佩带RNLTR12-int系列的逆转录病毒的侵入；系统发育分析标明，上述侵入发生在物种造成之后的单独侵入；关联词在无颌脊椎动物和无脊椎动物中衰退固定经过而丢失。在有颌脊椎动物中的屡次颓落侵入构建了固定的经过，进而造成了拷贝的各样性。

胎盘的合胞素基因来自ERV，通过不同哺乳动物的颓落驯化事件，亦然趋同进化。ERV1在脊椎动物基因组中的内生化与髓鞘造成的进化出现相勾通，这是脊椎动物进化的要道步伐。逆转录病毒感染关于包括东谈主类在内的物种髓鞘进化存在过甚焦虑的影响。

5.3GOF（功能得到实验）

RetroMyelin存在多重拷贝，使得一个基因座毁伤，其他拷贝不错充任缓冲剂，确保奢靡水平的转录抒发。髓鞘等复杂性状的进化是一个渐进、复杂的过程，由遗传、环境和选定压力之间的相互作用驱动。需要对RetroMyelin进行遗传固定，并造成新的髓鞘产生网罗。

因此通过GOF（功能得到）实验，在七鳃鳗中产生风雅髓鞘不单是是在短期内引入RetroMyelin和Mbp序列，需要构建一系列的基因抒发模块，在七鳃鳗固有的调控经过引入变量（RetroMyelin和Mbp序列），同期还需要玄虚谈判到当然选定模子和自主模子的总额因素，能力在七鳃鳗中指点出富厚的髓鞘合成旅途。

板块六：参考文件

1.Ghosh， Tanay et al. “A retroviral link to vertebrate myelination through retrotransposon-RNA-mediated control of myelin gene expression.” Cell vol. 187，4 (2024): 814-830.e23. doi:10.1016/j.cell.2024.01.011

2.Lamanna， Francesco， et al. "A lamprey neural cell type atlas illuminates the origins of the vertebrate brain." Nature Ecology & Evolution 7.10 (2023): 1714-1728.

3.Chen【ONEG-018】素人騙し撮り Vol.18 脱がし屋 美人限定。 三浦まい， Civia Z et al. “Schwann cell remyelination of the central nervous system: why does it happen and what are the benefits?.” Open biology vol. 11，1 (2021): 200352. doi:10.1098/rsob.200352